免疫反応を利用した各種解析技術と機器（1／７page）

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免疫反応を利用した各種解析技術と機器（1／７page）

TOPIX
● 免疫反応解析で用いられる実験手法
   （サンドイッチ法｜競合法（直接競合ELISA）｜直接吸着法（間接競合ELISA））
● 免疫反応解析に利用される機器
   ◆ プレートリーダー（吸光プレートリーダー｜発光プレートリーダー｜蛍光プレートリーダー）
   ◆ マイクロビーズアッセイシステム
● 発色を利用して検出する試薬｜発光を利用して検出する試薬｜蛍光を利用して検出する試薬
● 実験における注意点（プレートウォッシャー）
● 受託サービス

●免疫反応解析で用いられる実験手法

免疫反応解析で用いられる実験手法は、免疫反応を利用したアッセイ系では、基質と酵素の反応を組み合わせた酵素免疫抗体法（EIA法：Enzyme immunoassay）が殆どを占めています（図１）。

EIA（Enzyme ImmunoAssay）法は、抗体の抗原に対する結合反応（抗原抗体反応）に酵素による基質に対する触媒作用を組合せた実験法です。反応には大過剰の抗体を用いることで抗原の取りこぼしを抑え、検出能をあげています。反応に用いる酵素・発色・発光試薬・蛍光標識を変えることで、様々な目的のアッセイを構築することが出来ます。
説明Ⅰ：代表的な免疫グロブリンにはH鎖とL鎖があり、それぞれはジスルフィド結合によってヘテロテトラマーを形成している。それぞれの鎖の先端には、抗原に対して特異的な構造を持つ部分（抗原結合領域：V領域）があり、ここで抗原抗体反応が行われる。
説明Ⅱ：抗体に付加される標識として主に酵素が使用されるが、一部では蛍光標識が用いられる場合もある。どちらの標識方法にせよ、標識によって抗原抗体反応が阻害されることを防ぐため、標識はH鎖の定常領域（C領域）に付加される。

ご存知のように、

・EIAでは気質と酵素の反応において特異性や反応速度が非常に高く、
微量サンプルの検出に極めて有効な手段

・同程度の検出能力を持つ他法に比べて、試薬コスト・機器コスト・時間コストが低く、
特別な技能を習得する必要がない

という点で優れています。

ここでは、EIAの中でも代表的なアッセイとして登場する
固相酵素免疫検定法（ELISA法－Enzyme Linked Immunosorbent Assay）について、その下記のアッセイ法の種類とメリットとデメリットについて説明し、それぞれの特徴からどのような研究内容に適しているかを述べていきます。

・サンドイッチ法
・競合法（直接競合ELISA）
・直接吸着法（間接競合ELISA））

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