進化する細胞分離・測定の技術と機器（２／６page）

TOPIX

●　フローセルアナライザー

フローセルアナライザーは、細胞懸濁液とシース液の圧力比を測定セル内で細胞が１つずつ流れるように調節することで、細胞を均一な速度で１つずつ測定セル内に連続的に送り出します。この時のシース液：細胞懸濁液の圧力比は、細胞の大きさ・形状・測定スピード・測定内容などによって任意に調節可能で、様々なサンプル、アッセイに対応することが出来ます。セル内では複数の励起光/放射光/散乱光などを同時に検出しその結果は数値データとして保存され、統計解析などに用います(図２参照)。測定が終わったサンプルは廃液チューブに送られるため、フローセルアナライザーで特定の細胞のみを回収することはできません。

フローセルアナライザーでは、シース液によって単離された細胞に対して励起光を照射し、反射光や散乱光・蛍光を同時に取得していきます。前方散乱光の検出にはフォトダイオードを、側方散乱光や蛍光は高感度なPMT（光電子増倍管）が用いられているのが一般的です。通常、各散乱光の取得には複数の検出器が使用され、これらの検出器から電圧パルスの形でシグナルを取得します。 ※前方散乱光 ・・・レーザー光などの励起光に対して、低角度で前面に検出される光のことです。主に細胞表面や表層の基質に励起光が反射・散乱して発生し、細胞の大きさや形状などの情報を得るのに用います。 ※側方散乱光 ・・・レーザー光などの励起光に対して、約90度の角度で側面に検出される光のことです。細胞内の様々な物質（核やオルガネラ、細胞内顆粒など)に励起光が当たることによって発生します。このことから、細胞の内部構造や細胞内物質の割合などの情報を得るのに用います。